La mastitis bovina es la enfermedad m?s frecuente y costosa para la explotaci?n lechera. La mayor?a de los casos son causados por bacterias de los g?neros Staphylococcus y Streptococcus siendo Streptococcus uberis el principal pat?geno ambiental. La ineficacia de las medidas tradicionales para disminuir la tasa de infecci?n ha dirigido la b?squeda al desarrollo de vacunas para complementar las medidas de control existentes. Las prote?nas PauA y SUAM podr?an ser empleadas como ant?genos para el desarrollo de una subunidad vacunal. El presente trabajo estuvo dirigido a la obtenci?n de mutantes de S. uberis deficientes en los genes pauA y sua mediante mutag?nesis sitio-dirigida y la caracterizaci?n de dichas mutantes. Para la obtenci?n de mutantes se emple? el uso combinado de dos tipos de vectores con replicaci?n condicional derivados del pWV01: pORI280 y pG+host3. Fragmentos amplificados de los genes pauA y sua se clonaron en el pl?smido pORI280 y se recuperaron en la cepa E. coli EC1000 RepA+. Los pl?smidos recombinantes se emplearon para transformar la cepa S. uberis seleccionada y obtener mutantes. Se describe aqu? una estrategia distinta en la obtenci?n de mutantes en S. uberis.
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