RNA Interferenz durch T-MIDGE(R) Vektoren: RNAi mit dualen MIDGE Vektoren der Firma MOLOGEN, Immuntherapeutische Onkologie [German]

By Carsten Wenzel

Bachelorarbeit aus dem Jahr 2010 im Fachbereich Biologie - Genetik / Gentechnologie, Note: 1,3, Technische Universit t Berlin (Biotechnologie), Sprache: Deutsch, Abstract: Die RNA Interferenz durch kurze nicht-kodierende RNA Sequenzen (siRNA) erlaubt es der Forschung, neue Therapiem glichkeiten f r die Behandlung von Krankheiten, die ihre Ursache in fehlerhaften Regulationsmechanismen der Genexpression haben, zu entwickeln. Das patentierte minimalistische Design der MIDGE(R) Vektoren erm glicht eine siRNA Expression mit Hilfe von kleinen Expressionskassetten, die innerhalb der Zelle transient und ohne gro en Einfluss auf weitere Signalwege eine gezielte Inhibierung der Genexpression bewirken k nnen. Um bestehende Patentanspr che zu umgehen und einfachere, effizientere RNAi Vektoren zur Verf gung stellen zu k nnen, werden modifizierte T-MIDGE(R) hergestellt und getestet. Hierf r wurde mit synthetischen Methoden ein nicht-linearer DNA Vektor hergestellt, welcher durch Transfektion in S ugerzellen eingebracht wurde. Die Voraussetzung f r eine erfolgreiche Herstellung der Vektoren und Prozessierung innerhalb der Zelle stellt hohe Anspr che an die Reinheit der genutzten Oligodesoxynukleotide, welche zuerst erfolgreich optimiert und validiert wurden. Die Untersuchung der Gen-Knockdown-Eigenschaften erfolgte in CHO-K1 S ugerzellen aus Hamsterovarien mit einem dualen Luciferase-Reportergen Assay in Hinsicht auf den maximalen Gen-Knockdown sowie die Effizienz der neu entwickelten T-MIDGE(R) Vektoren. Hierbei zeigte sich ein deutlich verminderter Knockdown-Effekt im Vergleich zu linearen MIDGE(R) Vektoren oder weit verbreiteten Plasmid-basierten Vektoren. Dies f hrte zur weiteren Entwicklung neuartiger Einzelstrangvektoren, die nach erfolgreicher Synthese ebenfalls im Zellversuch getestet wurden. Der Gen-Knockdown blieb hierbei ebenfalls hinter linearen MIDGE(R) Vektoren zur ck. Die Ursachen f r den stark verminderten Knockdown-Ef

• Format: Paperback
• Language: German
• ISBN: 3668253749
• ISBN13: 9783668253742
• Release Date: September 2016
• Publisher: Grin Verlag
• Length: 56 Pages
• Weight: 0.19 lbs.
• Dimensions: 0.1" x 5.8" x 8.3"