Manipulation der Expression neuronaler Gerüstproteine mittels RNA-Interferenz [German]

By Maximilian Sohmen

Bachelorarbeit aus dem Jahr 2013 im Fachbereich Biologie - Genetik / Gentechnologie, Note: 1,7, Humboldt-Universit t zu Berlin (Institut f r Biologie), Sprache: Deutsch, Abstract: Diese Bachelorarbeit widmet sich der Klonierung und Expression diverser neuer Vektoren, die einerseits auf Basis des pSuper- (und des pLentiLox 3.7-) Plasmids den Gen-Knockdown von PSD-95, einem neuronalen Ger stprotein, mittels shRNA-induzierter RNA-Interferenz erm glichen. Andererseits werden auf pCMV-Tag-, pCherry-/pEYFP-N1 und pLentiLox 3.7-Plasmiden basierende Vektoren konstruiert, die die Einbringung diverser und z. T. Knockdown-resistenter PSD-95-Derivate in S uger-Zellen erlauben. Das langfristige Ziel ist es, die speziellen Eigenschaften dieser einzelnen Vektoren in einem Konstrukt zu kombinieren: Als Vektor lentiviralen Ursprungs soll er die M glichkeit des schonenden Gentransfers in sensible Nervenzellen in vitro und in vivo durch Infektion bieten. Innerhalb des Neurons kommt es hierdurch zur Stilllegung des "gesunden", endogenen PSD-95 mittels RNA-Interferenz. W hrenddessen wird eine vektorkodierte modifizierte, knockdown-resistente Variante des PSD-95 exprimiert, die in der Zelle die Rolle des endogenen Proteins an dessen statt einnimmt. Liegt ein solcher Vektor erst vor, ist es schnell und auf einfache Art und Weise m glich, zus tzliche Mutationen in das knockdown-resistente PSD-95 einzubringen. Das erlaubt den effektiven Scan verschiedener Mutationen, welche zum Beispiel im potentiellen Zusammenhang mit etwaigen Krankheiten stehen k nnten. Die Auswirkungen des mutanten Gens auf die Zellphysis k nnen dann mit verschiedensten Methoden, etwa elektrophysiologisch, weiter untersucht werden.

• Format: Paperback
• Language: German
• ISBN: 3668984387
• ISBN13: 9783668984387
• Release Date: November 2019
• Publisher: Grin Verlag
• Length: 68 Pages
• Weight: 0.22 lbs.
• Dimensions: 0.2" x 5.8" x 8.3"