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Paperback Isolierung und Charakterisierung eines Promotors des Copalyl-Diphosphat-Synthase-Gens [German] Book

ISBN: 6202492791

ISBN13: 9786202492799

Isolierung und Charakterisierung eines Promotors des Copalyl-Diphosphat-Synthase-Gens [German]

Das vorgestellte Material betrifft die Klonierung des Promotors und die In-silico-Identifizierung von cis-aktiven Elementen, die im Copalyl-Diphosphat-Synthase-Gen (CPS) von Salvia miltiorrhiza lokalisiert sind. Die Pflanze ist aufgrund ihrer bedeutenden biologischen Aktivit t, die von Terpenoidverbindungen namens Tanshinone abh ngt, medizinisch interessant. Da die Stoffwechselwege der Tanshinon-Biosynthese noch nicht vollst ndig aufgekl rt sind, haben wir uns entschlossen, den unbekannten Aspekt der Transkriptionsregulation von CPS, dem f r die Tanshinon-Biosynthese entscheidenden Enzym, zu entschl sseln. Wir haben zahlreiche cis-aktive Motive sowie homologe Transfaktoren identifiziert, die m glicherweise bei der Regulation des CPS-Gens von S. miltiorrhiza aktiv sind. Die Analyse der Transfaktor-Gene, die gemeinsam mit A. thaliana CPS exprimiert werden, und ihr Vergleich mit den Transfaktoren, die durch In-silico-Suchen des S. miltiorrhiza CPS-Promotors identifiziert wurden, ergab keine gemeinsamen Proteine. Um die Ergebnisse der In-silico-Suchen experimentell zu validieren, wurde der Einfluss von Auxin, Gibberellin, Salicyls ure und hoher Salzkonzentration auf die Promotoraktivit t untersucht: Die gus-Genexpression wurde 0, 12, 24, 48, 72 und 96 Stunden nach der Hormonbehandlung oder w hrend einer 96-st ndigen Exposition gegen ber 100 mM NaCl gemessen.

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