Wie funktionieren bestimmte gentechnische Methoden, die dringend ben tigte Ergebnisse liefern sollen? Welches Verfahren ist f r ein Experiment am besten geeignet? Welche Kontrollen sind sinnvoll? Wie genau muss ein Puffer angesetzt werden und wie war das noch mal mit der Reihenfolge im Pipettierschema? In der 5. Auflage dieses bew hrten Laborhandbuches werden molekularbiologische Methoden in Form von eindeutigen und reproduzierbaren Arbeitsvorschriften pr sentiert, um die t glichen H rden des Laboralltags zu meistern. Es richtet sich an Bachelor-, Master- oder Diplomstudierende sowie an Technische Assistenten, die neue Methoden etablieren wollen, und erfahrene Wissenschaftler zum schnellen Nachschlagen.
Die Autoren sind in Lehre und Forschung oder in der Industrie t tig und geben hier ihr Wissen und ihre jahrelange Laborerfahrung weiter. Die meisten Methoden und Rezepte sind erfolgreich etabliert, andere wurden erst aktuell eingef hrt. Zu Beginn eines jeden Abschnitts wird der Leser ber die wichtigsten Konzepte informiert. Es folgt ein praktischer Teil mit Arbeitsanleitungen, die Schritt f r Schritt das Erlernen und genaue Anwenden der Methoden erm glichen. Besonderer Wert wurde auf Sicherheitshinweise und das Aufzeigen m glicher Fehlerquellen gelegt.
Inhalts bersicht:
1 Allgemeine Methoden2 Gelelektrophoresen3 Isolierung von DNA4 Polymerase-Kettenreaktion (PCR)5 Klonierung von cDNA (cDNA-Genbank)6 Klonierung von genomischer DNA (genomische Genbank)7 Isolierung und Markierung von RNA8 RNA-Interference9 Gewebepr paration10 Detektion von Protein und Nucleins ure auf Membran11 In situ-Hybridisierung12 Transfektion von S ugerzellen13 Transformationsmethoden f r filament se Pilze14 Genexpression in E coli und Insektenzellen: Reinigung rekombinanter Proteine15 Das Pichia pastoris-Expressionssystem16 Verminderung der Genexpression ber Ribozym-Targeting17 Analyse der Genregulation18 Peptidarrays auf Cellulosemembranen19 Genexpressionsanalyse mit Microarrays20 Text- und sequenzbasierte Datenbank-Abfragen in der BioinformatikAnhang 1 Sequenzierung von DNAAnhang 2 Proteinidentifizierung und SequenzierungIn der 5. Auflage wurden neben der berarbeitung der grundlegenden Kapitel zu den molekularbiologischen Methoden die Kapitel zu RNAi, Bioinformatik und zu Microarrays deutlich ausgebaut. Ein Kapitel zur Fixierung und Aufbereitung von Gewebe ist neu hinzugekommen. Damit ist dieses Buch wiederum ein unverzichtbares Hilfsmittel f r jedes molekularbiologische Labor.
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