Aufreinigung und Konzentrierung anaboler Steroide mittels der Immunoaffinitätschromatographie [German]

By Marc Machnik

Inhaltsangabe: Einleitung: Die in der Spurenanalytik von pharmakologisch wirksamen Substanzen eingesetzten Extraktionsverfahren reichen oft nicht aus, um die gesuchte Substanz in der biologischen Matrix (Urin, Blut, Haar, etc.) eindeutig nachzuweisen. Das liegt zum einen daran, da die Konzentrationen dieser Substanzen u erst gering sind und zum anderen, da die Bioprobe eine solch komplexe Matrix bildet, da sich Interferenzen k rpereigener Stoffe bei der anschlie enden gaschromatographisch-massenspektrometrischen Detektion nicht vermeiden lassen. Durch eine besondere Aufreinigung, die Immunoaffinit tschromatographie genannt wird, sollen diese St rsubstanzen entfernt werden. Dabei macht man sich das in der Natur einzigartige Prinzip zunutze, nach dem Antik rper ihr korrespondierendes Antigen (zu analysierende Substanz) mit hoher Selektivit t erkennen und reversibel binden. Die Antik rper werden auf eine Festphase immobilisiert und anschlie end mit der Probe inkubiert. Die gesuchte Substanz kann so nach dem Schl ssel-Schlo -Prinzip von den Antik rpern gebunden werden, w hrend unspezifische Molek le in der Bioprobe verbleiben. Nach einer Waschphase wird mittels eines organischen Solvens die Dissoziation des Antik rper-Antigen-Komplexes bewirkt und der Analyt in gereinigter Form gewonnen. Die Herstellung von Antik rpern mit der gew nschten Spezifit t (z.B. gegen anabole Steroide) wurde in dieser Arbeit durch Kopplung von Steroidhormonen an ein Protein und Immunisierung von Kaninchen mit diesen Steroid-Protein-Konjugaten erm glicht. Kleine Molek le in der Gr enordnung von Steroiden l sen per se keine Immunantwort und damit keine Produktion von Antik rpern aus. Erst durch die Bindung an ein gro es Carriermolek l, wie z.B. Bovine Serum Albumin (BSA) oder Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH), werden sie vom Organismus als Fremdsubstanz erkannt und l sen die Antik rperproduktion aus. Die Gruppe der 17alpha-methylierten Steroide z hlt zu den am h ufigsten mi br uchlich e

• Format: Paperback
• Language: German
• ISBN: 3838624661
• ISBN13: 9783838624662
• Release Date: January 1999
• Publisher: Diplom.de
• Length: 180 Pages
• Weight: 0.53 lbs.
• Dimensions: 0.4" x 5.8" x 8.3"