Wir haben die Technik des TA-Klonens eines Gens, das f r die Antibiotikaresistenz, d.h. die Kanamycin-Resistenz, verantwortlich ist, genutzt, indem wir die grundlegenden Schritte des Klonierungsprozesses nachvollzogen haben.Hintergrund der Erfindung Eine wesentliche Voraussetzung f r eine wirksame gentechnische Ver nderung von Bakterien und anderen Zellen, die in Zellkulturen vermehrt werden, ist die F higkeit, die Zellen mit einer bestimmten genotypischen Ver nderung zu selektieren. Die g ngigste Selektionsstrategie in der rekombinanten DNA-Technologie ist die Aufnahme eines Selektionsmarkers in den Klonierungsvektor oder das Plasmid. Ein Selektionsmarker kann ein kloniertes Gen oder eine DNA-Sequenz sein, die es erm glicht, die Wirtszellen, die den Selektionsmarker enthalten, von denen zu trennen, die ihn nicht enthalten. Der Selektionsmarker zusammen mit einem geeigneten Selektionsmedium erh lt den Klonierungsvektor in den Zellen. Da die Replikation von Plasmiden eine energetische Belastung f r den bakteriellen Wirt darstellt, h tten sonst in einer wachsenden Kultur die Bakterien, die das Plasmid verloren haben, einen Wachstumsvorteil gegen ber den Zellen mit dem Plasmid.
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